Рідка тиогликолевой середовище / Рідка тиогликолевой середовище з м'ясним екстрактом

Цю середу використовують для контролю стерильності різних біоматеріалів, а також для культивування широкого кола аеробних та анаеробних бактерій.

 

 

Зростання на середовищі Fluid Thioglycollate Medium (M009)
1. Candida albicans
2. Clostridium sprogenes
3. Bacteroides vulgatus
4. Bacillus subtilis
5. Контроль (незасеянная середа)

 

Склад**

Інгредієнти	М009 грам/літр	М380 грам/літр
Гідролізат казеїну	15,00	15,00
Дріжджовий екстракт	5,00	5,00
М'ясний екстракт	–	5,00
Глюкоза	5,50	5,50
Натрію хлорид	2,50	2,50
L-цистин	0,50	0,50
Натрію тіогліколят	0,50	0,50
Резазурин	0,001	0,001
Агар-агар	0,75	0,75
Кінцеве значення ph (при 25°С)	7,1 ± 0,2	7,2 ± 0,2

** Склад вивірений і доведений до відповідності необхідним параметрам

Приготування:

Розмішати 29,75 г порошку М009 або 34,75 г порошку М380 в 1000 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм (121°С) протягом 15 хв. Остудити до 25°С і залишити для зберігання в темному прохолодному місці (при температурі нижче 25°С).

Примітка: якщо більш, ніж третина середовища зверху стала рожевого кольору, її можна один раз відновити, прогрів у киплячій водяній бані або струмені пари до зникнення рожевого забарвлення.

Принцип і оцінка результату:

Цю середу запропонував Брюер (1) для швидкого культивування аеробів, а також анаеробів (через додавання редуцирующего речовини і невеликої кількості агар-агару). Американські фахівці (2, 3) рекомендували зазначені середовища для тестів на стерильність антибіотиків, біоматеріалу, харчових продуктів, а також для визначення фенолового коефіцієнта і спороцидных властивостей дезінфектантів. Разом з тим, середовища призначені для дослідження прозорих рідин і водорозчинних матеріалів.

Глюкоза, гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, мясной экстракт и L-цистин дают питательные вещества для размножения бактерий. Тиогликолят натрия снижает окислительно-восстановительный потенциал, а также нейтрализует бактериостатический эффект соединений ртути и других тяжелых металлов, находящихся в исследуемом материале. Любое повышение концентрации кислорода сопровождается изменением цвета специального индикатора редокс-потенциала (резазурина) на красный (4, 5, 6). Низкий редокс-потенциал помогает поддерживать небольшое количество агара в среде (7).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет светло-соломенную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует; не более 10% в ее верхней части может окрашиваться в розовый цвет при хранении.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М009 (2,97% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2, раствор М380 (3,47% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 35°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост
*Bacillus subtilis (6633)	Обильный
*Candida albicans (10231)	Обильный
*Clostridium sporogenes (11437)	Обильный
*Micrococcus luteus (9341)	Рясний
Neisseria meningitidis (13090)	Рясний
Streptococcus pyogenes (19615)	Рясний
*Bacteroides vulgatus (8482)	Середній або хороший

Примітка: * культуру можна інкубувати при 25-30°С протягом 2-7 днів.